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懸浮細胞的處理方法;奧陸生物
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懸浮細胞處理方法

細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。

細胞懸液移入離心管,1000rpm/min 離心5分鐘。上清培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用。離心下來的細胞T25瓶中加培養液6-8ml,混勻后放入37℃、5%CO2孵箱培養。

傳代方法

細胞生長至1X106/ml時(一般情況),將細胞懸液移入離心管800-1000rpm/min離心5分鐘,然后棄上清,加新鮮培養液混勻,1瓶分成3瓶或6瓶-10瓶,T25瓶加培養基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養

 

細胞使用培養基:1、DMEM(高糖)    2、R1640    3、R1640(改良    4、MEM(EBSS)    5、MEM(NEAA)    6、D/F12    7、F12    8、F12K    9、MaCcoy‘    10、L15    

血清要求:1、20%FBS    2、15%FBS    3、10%FBS    4、5%FBS    5、2.5%FBS    6、15%HS    7、10%HS    8、5%HS    9、2.5%HS    10、10%CCF(滅活)

凍存液常規培養液+20%FBS+8%DMSO

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